Комплект для обнаружения флуоресцентной ПЦР вируса кожных заболеваний крупного рогатого скота (метод зонда)
Классификация:
Подробная информация
[Имя]
Общее название: набор для обнаружения флуоресцентной ПЦР вируса кожных заболеваний крупного рогатого скота (метод зонда)
Торговое название: Нет
文: Вирус кожной болезни комков ПЦР-тест в реальном времени (зонд)
[Использование]
Подходит для специфического обнаружения вирусов кожных заболеваний крупного рогатого скота в образцах поражений кожи животных, корки кожи, слюны, выделений из глаз и носа, молока, спермы, кала, переносчиков и других образцов.
[Основные ингредиенты и содержание]
Серийный номер | Компоненты продукта | Спецификация |
1 | Реакционная жидкость LSDVPCR (с зондом) (коричневая трубка) | 1 трубка (1,2 мл) |
2 | LSDV положительный контроль (красная крышка трубки) | 1 трубка (100 мкл) |
3 | LSDV положительный контроль (зеленая крышка трубки) | 1 трубка (100 мкл) |
4 | Инструкция по эксплуатации | 1 порции |
Примечание: компоненты разных номеров партий не используются взаимозаменяемо. Компоненты в наборе должны быть полностью смешаны и центрифугированы перед использованием (рекомендуется смешиваться с легким или перевернутом, не рекомендуется смешивать с вихревым генератором). Повторное замораживание и оттаивание!
[Область применения флуоресцентного инструмента ПЦР]
ABI7500Fast, ABI7500, Q5 и другие серии, серии Roche, серии BIO-RAD и другие флуоресцентные количественные детекторы ПЦР и т. Д.
1 Предварительная обработка образцов
① Болезнь крупного рогатого скота: 50 ~ 100 мг ткани коровьего заболевания, добавьте в ступку, содержащую 500 мкл LPBS или физиологический раствор, чтобы медленно измельчить в гомогенизационную суспензию, или используйте криофилометр ткани для измельчения, чтобы перенести измельченную гомогенизированную суспензию в стерилизованную пробирку без загрязнения РНК-ферментом, 6000 об/мин центрифугируют 30 с, берут верхний настой раствор для дальнейшего использования.
② Секреции, молоко и сперма, образующаяся при изъязвлении слюны и узелков: образец непосредственно взят на 6000 об/мин и центрифугируют в течение 1 мин;
2 Экстракция ДНК образца (зона обработки образца)
Приведенные выше образцы были взяты, вирусная ДНК была извлечена обычными методами, и вирусная ДНК также может быть извлечена с помощью коммерческого набора. Отрицательный контроль участвует в экстракции для мониторинга окружающей среды. Положительный контроль не требует экстракции и используется напрямую.
3 Формулирование системы ПЦР
3.1 Извлеките набор, извлеките из него реагенты, необходимые для эксперимента, расплавьте и перемешайте, и мгновенно центрифугируйте для удаления жидкости, прикрепленной к стенке трубы;
3.2 В соответствии с различными приборами PCRs выбирают реакционную трубку или реакционную пластину. Общий объем реакции составляет 25 мкл. Реакционный раствор готовят в зоне распределения жидкости, а образец добавляют в зоне обработки образца.
Компонентная реакционная труба | Измерительная трубка | Контрольная трубка | |
Положительный контроль | Отрицательный контроль | ||
Реакционная жидкость LSDVPCR (с зондом) | 20 мкл | 20 мкл | 20 мкл |
LSDV положительный контроль | - | 5 мкл | - |
LSDV отрицательный контроль | - | - | 5 мкл |
Образец ДНК | 5 мкл | - | - |
Общий объем | 25 мкл | 25 мкл | 25 мкл |
4 Усиление (зона обнаружения)
Установите условия реакции по следующим параметрам:
Параметры реакции | Температура предварительного изменения | 45 циклов | |
Дегенерация | Отжиг/удлинение | ||
Температура | 95 ℃ | 95 ℃ | 58 ℃ |
Время | 3 мин. | 10 сек | 34 сек |
Получение флуоресцентного сигнала устанавливается во время отжига/удлинения. Для многоканального флуоресцентного PCRметра флуоресцеин FAM был выбран в качестве канала сбора сигнала, генный выбор None был закален, а коррекция красителя была выбрана None.
5 результатов суждения
5.1 Условия эксперимента
5.1.1 Отрицательный контроль: кривая амплификации без специфичности или значение Ct> 45,0 или значение Ct без.
5.1.2 Положительный контроль: значение Ct должно быть <28,0, и появляется четкая S-образная кривая амплификации.
5.2 Определение результатов
5.2.1 Позитивный: результат теста образца Ct ≤ 40,0 и явная S-образная кривая амплификации, указывая на то, что в образце была обнаружена нуклеиновая кислота бычьего узлового кожного вируса.
5.2.2 Отрицательный: результат теста на образец Ct> 45,0 или отсутствие специфической кривой S-амплификации, что указывает на то, что в образце не было обнаружено нуклеиновой кислоты бычьего узлового кожного вируса.
5.2.3 Подозрительный: результат теста образца, значение Ct: 40,0 ~ Диапазон 45,0, образцы должны быть повторно проверены. Например, повторный экспериментальный результат, значение Ct все еще составляет 40,0 ~ Диапазон 45,0, с очевидным экспоненциальным увеличением, будет оценен как положительный, в противном случае он будет отрицательным.
[Примечание]
1 Пожалуйста, внимательно прочитайте руководство по набору перед экспериментом и выполните его строго в соответствии с операционными шагами.
2 Все реагенты должны храниться при заданной температуре, подробности см. На этикетке реагента.
3 Чтобы избежать перекрестного загрязнения, пожалуйста, работайте как можно больше в среде, свободной от нуклеазы, и разделите процесс тестирования (зона подготовки реагента, зона подготовки образца, зона амплификации и т. Д.).
4 При составлении реакционной системы ПЦР следует стараться избегать образования пузырьков воздуха. Перед усилением следует проверить, плотно ли закрывают реакционную трубку, чтобы предотвратить утечку и загрязнение оборудования.
5 Чтобы обеспечить точные результаты эксперимента, образцы стараются обеспечить свежий сбор, 2 ~ 8 ℃ для транспортировки, пожалуйста, используйте сухой лед для перевозки на дальние расстояния.
6 Все реагенты должны избегать многократного замораживания и оттаивания.
[Условия хранения и срок годности]
Набор хранили при-20 ° С и действителен в течение 12 месяцев.
[Показатели эффективности продукта]
Притивы и зонды, используемые в наборе, соответствуют тем, которые используются в национальных стандартах, которые находятся на рассмотрении. Набор обнаруживает минимальную чувствительность клинических образцов 2 копии/мкл.
[Спецификация]50 головок/коробка
[Производственное предприятие]Чунцин Aolong Биологические продукты Лтд
[Адрес]№ 5, Сизи Роуд, Индустриальный парк Баньцяо, район Жунчан, Чунцин
[Почтовый индекс] 402460
[Технические услуги]023-46763511
[Горячая линия продаж]023-46761801
Другие продукты
Мне нужно проконсультироваться.
Во время просмотра наших продуктов, есть ли что-нибудь, что вас особенно устраивает или что-то еще нужно сделать? Ваши консультации или предложения напрямую помогут нам улучшить качество наших продуктов и услуг и принесут вам более интимный опыт. Я
* Пожалуйста, заполните поле выше (поле * номер является обязательным), и мы ответим на ваш отзыв как можно скорее.